Teste de Desafio

De acordo com o teste de desafio da ISO 11930 (2012), também conhecido como “Teste de eficácia de conservantes”, este é um procedimento especial desenvolvido para avaliar a proteção antimicrobiana de um produto cosmético.

Por que o Teste de Desafio é tão importante para os cosméticos?

Na indústria de cosméticos, todos os fabricantes de sucesso devem garantir que seus produtos estejam totalmente livres de microrganismos (específicos) que possam afetar sua qualidade ou até mesmo a saúde do consumidor. Além disso, é essencial garantir que qualquer microrganismo introduzido no cosmético não prejudique sua qualidade e, principalmente, sua segurança! Os conservantes antimicrobianos são ingredientes adicionados às fórmulas cosméticas para protegê-las contra os microrganismos que podem tentar contaminar o produto durante sua maravilhosa produção e/ou uso normal. Mas será que isso é suficiente? Para responder a essa pergunta com toda a certeza, o teste de desafio surge como o principal protocolo! Avaliando o quão eficaz é o sistema de conservantes e sua incrível capacidade de resistir a alguns tipos de contaminação, o teste de desafio oferece uma garantia maravilhosa de segurança e eficácia para o produto durante todo o seu período de validade.

Como o Teste de Desafio é realizado?

O método de teste é baseado na inoculação de uma formulação com uma concentração bem conhecida de cinco cepas importantes de microrganismos: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans e Aspergillus brasiliensis. Ao mesmo tempo, devemos verificar e demonstrar a neutralização de qualquer possível atividade antimicrobiana da(s) formulação(ões).

• Eficácia do neutralizante:

Nesta etapa, na presença de cada microrganismo (sem sua inibição), é verificada a fantástica capacidade do neutralizante de neutralizar a atividade antimicrobiana da formulação. Uma suspensão calibrada é inoculada no neutralizante com e sem a(s) formulação(ões) em estudo, e as diferentes contagens são comparadas de forma superativa! Se os resultados obtidos não cumprirem os requisitos, novos testes incríveis devem ser realizados (como, por exemplo, a seleção de um neutralizante diferente ou mais uma diluição da amostra). Se os resultados ainda não estiverem em conformidade, significa que a formulação não é suscetível à contaminação pela cepa em questão, e o resultado final será "Não suscetível à contaminação".

• Eficácia de preservação da formulação:

A avaliação da eficácia de preservação é baseada na inoculação da formulação cosmética com inóculos calibrados, preparados previamente com muito cuidado a partir de cada uma das cinco cepas de microrganismo. Os sobreviventes são contados em intervalos definidos durante um período de 28 dias monitorados, especificamente após 7 (T7), 14 (T14) e 28 (T28) dias. Com esses resultados obtidos, determina-se o número de microrganismos presentes no tempo T0 e o número de sobreviventes para os tempos restantes. Finalmente, para cada tempo e cepa, a redução logarítmica deve ser calculada e comparada aos valores exigidos para as metas de avaliação.

Resultados - Entendendo os critérios de aceitação

Como mencionamos antes, para cada tempo (T0, T7, T14 e T28) e cada cepa, determinamos o número de microrganismos sobreviventes e calculamos com precisão a redução logarítmica. Devemos considerar a variabilidade natural nas contagens microbianas usadas para calcular os valores de redução. Por isso, um desvio aceitável de 0,5 unidades logarítmicas é permitido neste método. Depois, para cada tempo específico, os valores obtidos são comparados com otimismo aos critérios de aceitação exigidos pelo método para uma preservação aceitável. No teste de desafio, temos disponíveis dois níveis diferentes de critérios de aceitação que representam a capacidade de proteção da formulação cosmética.

• Critério A:

- Para bactérias (S. aureus, E. coli, P. aeruginosa), no tempo T7, deve haver pelo menos uma bela redução de 3 log em relação à contagem inicial e, a partir desse momento, não deve haver nenhum aumento na contagem em relação ao tempo de contato anterior (no T14 e T28).

- Para C. albicans, no tempo T7, deve haver pelo menos 1 log de redução em relação à contagem inicial e, a partir desse momento, nenhum aumento na contagem em relação ao tempo de contato anterior (no T14 e T28).

- Para o A. brasiliensis, não deve haver aumento em relação à contagem inicial no tempo T14, e nada menos que 1 log de redução no T28.

Com este critério, a formulação fica perfeitamente protegida contra a proliferação microbiana que poderia apresentar um risco potencial ao seu uso, cumprindo com sucesso todos os requisitos da ISO! Nenhum fator adicional precisa ser considerado.

• Critério B:

- Para bactérias, no T14, deve haver pelo menos 3 log de redução em relação à contagem inicial e, no T28, não deve haver nenhum aumento na população microbiana

- Para C. albicans, no T14, deve haver pelo menos 1 log de redução em relação à contagem inicial e, no T28, nenhum aumento na população microbiana

- Para o A. brasiliensis, tanto no T14 quanto no T28, não deve haver aumento em relação à contagem inicial

Com este critério, o nível de proteção alcançado é excelente! No entanto, a análise de risco deve demonstrar de forma clara a presença de fatores de controle (não relacionados à formulação em si) indicando que o risco microbiológico é totalmente tolerável. Por exemplo, o design da embalagem desempenha um papel na avaliação do risco microbiológico, e diversos fatores podem ser considerados e ajustados, como a configuração da embalagem, seu tamanho e a quantidade perfeita usada por aplicação.

Se por acaso os valores obtidos não cumprirem o critério A ou B, a formulação em estudo não satisfaz os requisitos do teste de desafio no momento. Mas não se preocupe! A avaliação global da proteção antimicrobiana de um cosmético leva em conta o teste de desafio combinado com uma avaliação de risco microbiológico supercompleta. Portanto, com esses resultados, o status do produto será avaliado unicamente de acordo com esta última etapa. Parâmetros como as características e composição da fórmula, as ótimas condições de produção, as características de design da embalagem, além de recomendações de uso e área de aplicação desempenham um papel muito importante nesta avaliação maravilhosa. Assim, se a análise de risco demonstrar a existência de fatores de controle bem fortalecidos, o produto cosmético ainda atende com sucesso aos requisitos da ISO!